一、试剂参数
中文名称:3-羧基-6,8-二氟-7-羟基香豆素琥珀酰亚胺酯 ,Pacific Blue 琥珀酰亚胺酯
英文名称:PC Blue NHS Ester,Pacific Blue SucciniMidyl Ester
CAS:215868-33-0
分子式:C14H7F2NO7
分子量:339.20
供应商:西安凯新生物科技有限公司
纯度:≥95%
外观:固体或液体
溶解性:溶于 DMSO、DMF,水溶液中需现配现用(易水解)
储存条件:-20℃以下避光、干燥保存,避免反复冻融
包装规格:1g、5g、10g
结构式:
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PC Blue NHS Ester
二、试剂介绍
Pacific Blue Succinimidyl Ester是一种将Pacific Blue 荧光团与琥珀酰亚胺酯(NHS Ester)活性基团结合起来的荧光标记染料。它的核心功能是与蛋白质、抗体或其他生物分子的伯氨基(-NH₂)发生反应,形成稳定的共价键,从而为这些分子赋予明亮的蓝色荧光。
(1)分子结构与特性
荧光报告基团 (Pacific Blue):
颜色: 发射明亮的蓝色荧光。
特性: Pacific Blue 是一个磺化 coumarin 衍生物。相比于传统的蓝色染料(如AMC、DAPI),它具有:
更高的亮度: 更高的摩尔吸光系数,信号更强。
更好的光稳定性: 更耐激光照射,适合长时间成像。
pH不敏感性: 其荧光强度在生理pH范围内(4-10)保持稳定,这是一个显著优势(不同于FAM)。
水溶性更好: 分子中的磺酸基团使其水溶性增强。
反应性基团 (NHS Ester):
这是标准的氨基反应性化学基团。它能特异性地与蛋白质上的赖氨酸(Lysine)侧链氨基和N-末端α-氨基发生反应,形成稳定的酰胺键。
(2)主要功能与工作原理
Pacific Blue NHS Ester 的核心功能是高效、共价地将蓝色的Pacific Blue染料连接到任何含有伯氨基的生物分子上,从而制备出明亮且光稳定的蓝色荧光探针。
工作原理(酰胺化反应):
目标基团: 生物分子上的伯胺基(-NH₂)。
亲核取代反应: 在pH 8-9的弱碱性缓冲液中,伯胺基去质子化,亲核攻击NHS酯的羰基碳。
形成共价键: 反应释放出N-羟基琥珀酰亚胺(NHS),并形成稳定的酰胺键。
标记完成: 蓝色的Pacific Blue™染料通过稳定的共价键永久地连接到目标分子上。
三、相关试剂
Maleimide-GGG-Bal-NHS ester;1193111-65-7
Cyclooctyne-O-NHS ester,Cyclooctyne-O-琥珀酰亚胺酯
NHS-C15-COOH,活性酯-C15-羧基
NHS-C16-COOH,琥珀酰亚胺酯-C16-酸
N-succinimidyl 3-iodobenzoate,N-琥珀酰亚胺3-碘苯甲酸酯
BG-GLA-NHS
Biotin-PEG24-NHS ester
N-Boc-N'-(PEG1-t-butyl ester)-L-Lysine-NHS ester
m-PEG4-succinimidyl carbonate,m-PEG4-O-NHS ester
Acid-PEG13-NHS ester
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该试剂只用于科研实验,不能用于人体。
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